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本生帶您了解、TAE緩沖液與TBE緩沖液的作用區(qū)別

更新時間:2023-05-06    點擊次數(shù):1240

  本生帶您了解、TAE緩沖液與TBE緩沖液的作用區(qū)別


  分子生物學(xué)實驗中常用的電泳緩沖液主要有三種:TAE、TBE和TPE。TBE與TPE緩沖容量高,DNA分離效果好,但TPE會導(dǎo)致DNA片段回收時含磷酸鹽濃度高,容易使DNA沉淀。TAE緩沖容量低,但價格較便宜,TBE緩沖液含有的EDTA可螯合二價陽離子,可抑制DNase活性,防止PCR擴(kuò)增產(chǎn)物降解。

  TAE緩沖液的特點:

  TAE是使用泛的緩沖系統(tǒng)。其特點是超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子質(zhì)量(TBE中電泳時測出的相對分子質(zhì)量會大于實際分子質(zhì)量),且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%,電泳大于13kb的片段時用TAE緩沖液將取得更好的分離效果,此外,回收DNA片段時也易用TAE緩沖系統(tǒng)進(jìn)行電泳。TAE的缺點是緩沖容量小,長時間電泳(如過夜)不可選用,除非有循環(huán)裝置使兩極的緩沖液得到交換。

  TBE緩沖液的特點:

  TBE 緩沖液也是常用的核酸電泳緩沖鹽溶液,主要用于DNA的瓊脂糖凝膠電泳。TBE的主要成分是Tris-硼酸鹽與EDTA,緩沖能力強(qiáng),適合較長時間電泳,分辨率較高,電泳小于1kb的片段時分離效果好。TBE 緩沖液中的硼酸成分會影響DNA回收效率以及后續(xù)的酶反應(yīng),TBE用于瓊脂糖凝膠時易造成高電滲作用,并且因與瓊脂糖相互作用生成非共價結(jié)合的四羥基硼酸鹽復(fù)合物而使DNA片段的回收率降低,所以不宜在回收電泳中使用。若要進(jìn)行DNA片段的瓊脂糖凝膠電泳回收實驗,建議使用TAE 緩沖液。

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