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根據(jù)與分子結(jié)合能力的不同,酶標板96孔又可分為這幾個類型

更新時間:2022-09-28    點擊次數(shù):901
   根據(jù)不同的分類標準,酶標板有著不同的分類。一、根據(jù)孔數(shù),可分為96孔、48孔等,由于酶標板主要是配合酶標儀用,目前市面上的酶標儀最多為96孔,因此最為常用的酶標板96孔。
  根據(jù)酶標板與蛋白和其它分子結(jié)合能力的不同,又分為高結(jié)合力、中結(jié)合力和氨基化等。
  1、高結(jié)合力
  此種酶標板,表面經(jīng)處理后,其蛋白結(jié)合能力大大增強,可達300~400ngIgG/cm2,主要結(jié)合的蛋白分子量>10kD。使用該類酶標板可提高敏感性,并可相對減少包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易產(chǎn)生非特異性反應(yīng)。抗原或抗體包被后,以非離子去污劑無法有效地封閉未結(jié)合蛋白的部位,需使用蛋白作為封閉劑。
  2、中結(jié)合力
  此類酶標板經(jīng)表面疏水鍵被動與蛋白結(jié)合,適合作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體,其蛋白結(jié)合能力為200~300ngIgG/cm2。由于該類酶標板所具有的僅與大分子結(jié)合的特性,適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體,可降低潛在的非特異性交叉反應(yīng)。
  小結(jié):該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液。
  3、氨基化
  這種酶標板經(jīng)表面改性處理后擁有帶正電荷的氨基,其疏水鍵由親水鍵取代。該類酶標板適合作為小分子蛋白的固相載體。使用合適的緩沖液和pH值,其表面可通過離子鍵與帶負電荷的小分子結(jié)合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯(lián)劑共價結(jié)合的能力,可用于固定溶于Triton-100、Tween20等去污劑的蛋白分子。
  小結(jié):該類板的缺陷為由于降低了疏水性,一部分蛋白分子無法結(jié)合;此外其表面需有效地封閉。由于親水和共價的表面特性,使用的封閉液必須能夠與非反應(yīng)性氨基基團和所選擇的交聯(lián)劑中任何功能基團發(fā)生作用。
 

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