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使用胎牛血清的常見誤區(qū)有哪些?
使用胎牛血清時常見的誤區(qū)主要包括以下幾點:
?儲存條件不當(dāng)?:
誤區(qū):將血清長時間儲存在2-8℃環(huán)境中,或反復(fù)凍融。
正確做法:?血清應(yīng)長期保存在-20℃以下?,避免反復(fù)凍融。若需頻繁使用,可在4℃下短期保存(不超過一個月),但應(yīng)盡快用完并避免污染。
?解凍方法不正確?:
誤區(qū):直接將血清從冷凍狀態(tài)置于室溫或高溫水浴中快速解凍。
正確做法:?推薦采用梯度融化方法?,先將血清置于4℃冰箱中融解,或在室溫下緩慢解凍,并規(guī)則地搖晃均勻。避免使用高溫水浴快速解凍,以減少沉淀的產(chǎn)生。
?處理絮狀沉淀不當(dāng)?:
誤區(qū):認為絮狀沉淀是有害的,必須過濾去除。
正確做法:?絮狀沉淀主要由纖維蛋白和脂蛋白組成,是正?,F(xiàn)象,不影響血清質(zhì)量?。可以通過離心(如400g,1-2分鐘)將沉淀沉至瓶底,然后小心地將上清液轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶中。大多數(shù)情況下,輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。不建議使用過濾方法去除沉淀,因為可能會堵塞濾膜?。
?未考慮血清的適用性?:
誤區(qū):盲目選擇血清品牌,不考慮實驗的具體需求和細胞的適應(yīng)性。
正確做法:?在選擇血清時,應(yīng)考慮實驗的具體需求、細胞的生長特性和血清的來源、質(zhì)量等因素?。可以先提取一部分細胞進行試用,按照比例替換血清,以觀察細胞的適應(yīng)情況。
?忽視無菌操作?:
誤區(qū):在儲存、解凍和使用血清過程中忽視無菌操作。
正確做法:?整個操作過程應(yīng)在無菌操作臺中進行,注意無菌操作?,以避免污染。
?對血清滅活處理的理解不足?:
誤區(qū):認為所有情況下都需要對血清進行滅活處理。
正確做法:?血清滅活不是強制要求,客戶可以自行選擇是否進行?。滅活條件為水浴溫度56℃,30分鐘。但需注意,滅活后的血清可能會出現(xiàn)沉淀變多的現(xiàn)象。溶液
通過避免這些常見誤區(qū),可以更有效地利用胎牛血清進行細胞培養(yǎng),提高實驗效果和數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。
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