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什么是凍干試劑管,制備凍干管的過程操作您知道多少?

更新時間:2023-07-07    點擊次數(shù):4703

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  制備凍干管的操作步驟是什么?

  1.安瓿管準備

  安瓿管材料以中性玻璃為宜。清洗安部管時,先用2%鹽酸浸泡過夜,自來水沖洗干凈后,用蒸餾水浸泡至pH中性,干后、貼上標簽,標上菌號及時間,加入脫脂棉塞后,121℃下高壓滅菌15-20分鐘,備用。

  2.保護劑的選擇和準備

  保護劑種類要根據(jù)微生物類別選擇。配制保護劑時,應注意其濃度及 pH值,以及滅菌方法。如血清,可用過濾滅菌;牛奶要先脫脂,用離心方法去除上層油脂,一般在100℃間歇煮沸2-3次,每次10-30分鐘,備用。

  3.凍干樣品的準備

  在最適宜的培養(yǎng)條件下將菌種培養(yǎng)至靜止期或成熟期,進行純度檢查后,與保護劑混合均勻,分裝。微生物培養(yǎng)物濃度以細胞或孢子不少于 108-1010個ml為宜(以大腸桿菌為例,為了取得每毫升1010個活細胞菌液2毫升-2.5毫升,只需10毫升瓊脂斜面兩支)。

  4.預凍

  般預凍2小時以上,溫度達到-20℃到-35℃左右。

  5.冷凍干燥

  采用冷凍干燥機進行冷凍干燥。

  將冷凍后的樣品安部管置于冷凍干燥機的干燥箱內,開始冷凍干燥,時間一般為8-20小時。

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