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ELISA實驗中需注意事項及操作步驟!

更新時間:2023-06-29    點擊次數(shù):4213
  ELISA實驗中需注意事項及操作步驟!
 
  ELISA試劑盒實驗中出現(xiàn)各種問題,如果能提前知道一些關(guān)于elisa實驗的要領(lǐng)就可以正確的避免這些問題的出現(xiàn),BUNSEN本生總結(jié)問題:
 
  1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。
 
  2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時。
 
  3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
 
  4、ELISA試劑盒實驗時,要使底物避光保存。
 
  5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
 
  6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
 
  7、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
 
  8、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
 
  9、應(yīng)盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
 
  10、ELISA試劑盒對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。
 
  在ELISA試劑盒中通常有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶物,加底物。加樣時應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部,防止加在孔壁上部,并留意不行濺起,不行發(fā)作氣泡。加標(biāo)本通常用微量加樣器,按規(guī)則的量參加板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,以發(fā)作穿插污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。
 
  有此測定(如間接法ELISA)需用稀的血清,可在試管中按規(guī)則的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中參加稀釋液,再在其參加血清標(biāo)本,然后在微型震動器上震動1分鐘以保證混和。加酶物使用液和底物用液時可用定量多道加液器,使加液進(jìn)程迅速完結(jié)。在雙抗體夾心法測定抗原時,如使用對于抗原分子上兩個不一樣抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體。
 
  ELISA試劑盒則在測守時可使標(biāo)本的參加和酶標(biāo)抗體的參加兩步并作一步。這種雙位點一步不光簡化了操作,縮短了反應(yīng)時間,如使用高親和力的單克隆抗體,測定的敏感性和特異性也明顯進(jìn)步。單克隆抗體的使用使測定抗原的ELISA試劑盒進(jìn)步到新水平。
 
  elisa試劑盒本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。
 

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